Knudsonov medij za orhideje

Knudsonov medij je umjetni hranjivi medij koji je 1946. godine razvio američki botaničar Lewis Knudson za klijanje sjemenki orhideja i poticanje rasta u sterilnim uvjetima. Jedan je od najčešće korištenih medija za uzgoj orhideja in vitro i popularan je za laboratorijsku i kućnu primjenu.

Što je knudsonov medij?

Orhideje prirodno rastu u simbiozi s mikoriznim gljivama, koje osiguravaju esencijalne hranjive tvari. Međutim, reprodukcija ove simbioze u laboratorijskim uvjetima je nemoguća. Knudsonov medij razvijen je kao zamjena bogata hranjivim tvarima koja osigurava sve esencijalne elemente potrebne za klijanje sjemena i rast sadnica.

Sastav knudsonovog medija

Standardna formula uključuje:

• Šećer: primarni izvor energije.
• Mineralne soli:
  • Kalijev nitrat (kNO₃) – izvor dušika.
  • Magnezijev sulfat (mgso₄) – osigurava magnezij i sumpor.
  • Kalijev dihidrogenfosfat (kh₂po₄) – opskrbljuje fosforom i kalijem.
  • Kalcijev klorid (cacl₂) – izvor kalcija.
• Vitamini:
  • Nikotinska kiselina, tiamin i piridoksin za aktiviranje metaboličkih procesa.
  • Željezo, cink, mangan i drugi elementi neophodni za razvoj tkiva.
  • Agar-agar za stvaranje čvrstog medija, sprječavajući da sjeme ili sadnice potonu.
• Elementi u tragovima:
• Sredstva za želiranje:

Prednosti korištenja knudsonovog medija

1. Potiče klijanje sjemena:
   • Osigurava sve potrebne hranjive tvari za klijanje, zamjenjujući potrebu za gljivičnom simbiozom.
2. Sterilno okruženje:
   • Stvara idealne uvjete za rast bez rizika od bakterijske ili gljivične kontaminacije.
3. Optimalni uvjeti rasta:
   • Podržava razvoj sadnica dok ne budu spremne za presađivanje u supstrat.
4. Pogodno za različite vrste orhideja:
   • Formula se može prilagoditi specifičnim potrebama različitih vrsta orhideja.

Primjena knudsonovog medija

1. Klijanje sjemena:
   • Sjemenke orhideja se steriliziraju (obično otopinom natrijevog hipoklorita).
   • Sterilno sjeme se stavlja na površinu hranjivog medija u petrijeve zdjelice ili epruvete.
2. Rast sadnica:
   • Supstrat podržava razvoj sadnica dok se ne pojave listovi i početni korijenski sustav.
3. Presađivanje u supstrat:
   • Nakon što sadnice dosegnu odgovarajuću veličinu, presađuju se u odgovarajući supstrat (npr. koru, sfagnumsku mahovinu).

Kako pripremiti knudsonov medij?

Sastojci (primjer za 1 litru):

• Agar-agar: 10 g
• Šećer: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• MgSO₄·7h₂o: 250 mg
• Cacl₂·2h₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitamini (tiamin, nikotinska kiselina): 1 mg svaki
• Mikroelementi (npr. feso₄): 1–2 mg
• Destilirana voda: 1 l

Koraci:

1. Sve komponente otopite u destiliranoj vodi.
2. Dodajte agar-agar i zagrijavajte dok se potpuno ne otopi.
3. Otopinu ulijte u sterilne posude (petrijeve zdjelice, epruvete).
4. Sterilizirajte medij u autoklavu ili vodenoj kupelji (15 minuta na 121°C).
5. Ohladite medij kako bi se stvrdnuo.

Savjeti za korištenje knudson medija

1. Održavajte sterilnost:
   • Radite u sterilnim uvjetima kako biste spriječili kontaminaciju.
2. Praćenje temperature:
   • Kulture čuvajte na +20–25°C.
3. Osigurajte dovoljno svjetla:
   • Osigurajte meko, difuzno osvjetljenje 12-14 sati dnevno.
4. Presađivanje:
   • Sadnice presadite u supstrat kada su dovoljno velike za samostalan rast.

Zaključak

Knudsonov medij je ključni alat za uspješno klijanje sjemenki orhideja i uzgoj zdravih sadnica. Pruža savršenu ravnotežu hranjivih tvari za rast, eliminirajući potrebu za gljivičnom simbiozom. Ovaj medij je idealan za razmnožavanje rijetkih i ukrasnih vrsta orhideja, bilo u laboratoriju ili kod kuće.